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免疫调节功能改变可引发前列腺炎

发布时间: 2012-11-06 13:52 来源:复禾健康

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Ⅲ型前列腺炎(chronicprostatitis/chronicpelvicpainsyndromes,CP/CPPS)是前列腺炎中最常见的类型,其发病机制复杂。维生素D是一种具有多种生物效应的激素类载体,参与细胞免疫功能调节,其是通过维生素D受体(vitaminDreceptor,VDR)发挥生理作用的。VDR基因启动子上存在FokⅠ位点单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP),是目前发现的唯一影响VDR氨基酸结构的多态性位点。本研究主要探讨VDR基因FokⅠ位点SNP与Ⅲ型前列腺炎发生的关系。

1对象与方法
1.1研究对象采用病例对照研究。收集2009年8月至2010年7月在本院治疗的Ⅲ型前列腺炎患者103例为A组,以《中国泌尿外科疾病诊断治疗指南》(2009版)为诊断标准,年龄25~39岁。同时收集100例非前列腺疾病患者为B组,均为男性,年龄20~40岁。两组年龄差异无统计学意义(P>0.05)。所有研究对象均为汉族。两组患者既往均无前列腺炎病史,无诱发Ⅲ型前列腺炎的相关职业暴露。本研究经本院伦理委员会批准,参试者均
签署知情同意书。
1.2方法
1.2.1DNA的提取抽取研究对象肘静脉血2mL,采用TIANamp GenomicDNAKit试剂盒(深圳晶美)提取基因组。
1.2.2PCR-RFLP分析多态性通过GenBank检索到VDR基因序列[gi:29745161],
Genefisher设计引物:上游5′ACTGACTCTGGCTCTGAC3′;下游5′CACCTTGCTTCTTCTCCC3′,引物合成由深圳晶美公司完成。PCR反应体系:反应总体积为50μL,含2μL模板DNA,8μL上、下游引物,2μLdNTPs,0.7μLTaqDNA聚合酶和相应的缓冲液。反应条件为:预变性96℃8min,94℃45s,52℃60s,72℃30s,共40个循环。72℃延伸10min。取10μLPCR产物加入限制性内切酶FokⅠ(深圳晶美)0.5μL及10×buffer1μL,牛血清白蛋白1μL,DNA7.5μL,总反应体系20μL,37℃酶切,2%的琼脂糖凝胶对酶切产物电泳,自动凝胶成像仪成像,检测基因型。
1.3统计学方法用直接计算法计算两组患者的基因型和等位基因频率,两组间VDR基因型分布以及等位基因的频率差异用χ2检验。所有数据采用SPSS17.0统计软件分析。P<0.05说明差异有统计学意义。
2结果
2.1VDR基因FokⅠ多态性以及等位基因在两组中的分布ff基因型在A组为41%(42/103),B组为34%(34/100),该基因型在两组间的分布差异有统计学意义(P<0.05),而FF和Ff基因型的分布在两组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。F基因频率在A组为44%(90/206),与B组相比差异无统计学意义(P>0.05),而f基因频率在A组为56%
(116/206)与B组差异有统计学意义(P<0.05)。
3讨论
CP/CPPS是目前临床上最常见的前列腺炎。其病因学十分复杂。有学者认为其可能是一种免疫炎症性疾病[3]。免疫反应异常可能是其发生的一种
原因。
维生素D及其受体在钙磷代谢中起着重要作用,同时具有免疫调节作用。目前已经发现的VDR基因上存在的与炎症性疾病发生有关的基因多态性位点有BsmⅠ﹑TaqⅠ﹑FokⅠ等酶切位点,其中FokⅠ位于启动子上[4-5],启动子结构的改变对基因的表达会产生调节作用。在大多数的免疫器官和免疫细胞中均存在VDR的表达。这也是其发挥免疫调节作用的基础。
国内学者张东涛等研究发现,HLA-DQA1不同等位基因频率与类风湿性关节炎的易感性不同。倪莉等通过对CYP27B1启动子(-1260,C/A)基因多态性与桥本甲状腺炎的研究发现,C为易感基因位点,而A可能是桥本抗原保护基因。李升等认为VDR基因上的BsmⅠ和ApaⅠ位点多态性与广泛性侵袭性牙周炎无相关性,但需进行不同种族以及更大样本量的分析。
本研究通过PCR-RFLP方法检测了VDR基因启动子上存在的FokⅠ基因SNP与CP/CPPS发生之间的关系。发现A组中ff基因型例数高于B组,差异有统计学意义,说明ff基因型与CP/CPPS的发生有一定的关系,FokⅠ多态性可能通过影响VDR基因转录活性,从而影响其的免疫调节功能,进而导致CP/CPPS的发生。但具体的分子生物学机制尚需行进一步研究。

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