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免疫调节功能改变可引发前列腺炎

发布时间: 2012-11-06 13:52 来源:复禾健康

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Ⅲ 型前列腺炎(chronic prostatitis / chronicpelvic pain syndromes, CP / CPPS)是前列腺炎中最常见的类型,其发病机制复杂。维生素D 是一种具有多种生物效应的激素类载体, 参与细胞免疫功能调节, 其是通过维生素D 受体(vitamin Dreceptor, VDR)发挥生理作用的。VDR 基因启动子上存在Fok Ⅰ 位点单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism,SNP),是目前发现的唯一影响VDR 氨基酸结构的多态性位点。本研究主要探讨VDR 基因FokⅠ位点SNP 与Ⅲ 型前列腺炎发生的关系。

1 对象与方法
1.1 研究对象采用病例对照研究。收集2009 年8 月至2010 年7 月在本院治疗的Ⅲ型前列腺炎患者103 例为A 组,以《中国泌尿外科疾病诊断治疗指南》(2009 版)为诊断标准,年龄25 ~ 39 岁。同时收集100 例非前列腺疾病患者为B 组, 均为男性, 年龄20 ~ 40 岁。两组年龄差异无统计学意义(P > 0.05)。所有研究对象均为汉族。两组患者既往均无前列腺炎病史,无诱发Ⅲ型前列腺炎的相关职业暴露。本研究经本院伦理委员会批准,参试者均
签署知情同意书。
1.2 方法
1.2.1 DNA 的提取抽取研究对象肘静脉血2mL,采用TIANamp Genomic DNA Kit 试剂盒(深圳晶美)提取基因组。
1.2.2 PCR-RFLP 分析多态性通过GenBank 检索到VDR 基因序列[gi:29745161],
Genefisher 设计引物: 上游5′ACTGACTCTGGCTCTGAC3′ ; 下游5′ CACCTTGCTTCTTCTCCC 3′, 引物合成由深圳晶美公司完成。PCR 反应体系:反应总体积为50 μL,含2 μL 模板DNA, 8 μL 上、下游引物,2 μL dNTPs,0.7μL Taq DNA 聚合酶和相应的缓冲液。反应条件为:预变性96℃ 8 min, 94℃ 45 s,52℃ 60 s,72℃ 30 s,共40个循环。72℃延伸10 min。取10 μL PCR 产物加入限制性内切酶FokⅠ (深圳晶美)0.5 μL 及10 × buffer 1μL,牛血清白蛋白1 μL,DNA 7.5 μL,总反应体系20μL,37℃酶切,2%的琼脂糖凝胶对酶切产物电泳,自动凝胶成像仪成像,检测基因型。
1.3 统计学方法用直接计算法计算两组患者的基因型和等位基因频率, 两组间VDR 基因型分布以及等位基因的频率差异用χ2 检验。所有数据采用SPSS 17.0 统计软件分析。P < 0.05 说明差异有统计学意义。
2 结果
2.1 VDR 基因FokⅠ多态性以及等位基因在两组中的分布ff 基因型在A 组为41%(42 / 103),B 组为34%(34 / 100),该基因型在两组间的分布差异有统计学意义(P < 0. 05),而FF 和Ff 基因型的分布在两组之间的差异无统计学意义(P >0.05)。F 基因频率在A 组为44%(90 / 206), 与B 组相比差异无统计学意义(P > 0.05),而f 基因频率在A 组为56%
(116 / 206)与B 组差异有统计学意义(P < 0.05)。
3 讨论
CP / CPPS 是目前临床上最常见的前列腺炎。其病因学十分复杂。有学者认为其可能是一种免疫炎症性疾病[3]。免疫反应异常可能是其发生的一种
原因。
维生素D 及其受体在钙磷代谢中起着重要作用,同时具有免疫调节作用。目前已经发现的VDR基因上存在的与炎症性疾病发生有关的基因多态性位点有BsmⅠ﹑TaqⅠ﹑FokⅠ等酶切位点, 其中FokⅠ 位于启动子上[4-5],启动子结构的改变对基因的表达会产生调节作用。在大多数的免疫器官和免疫细胞中均存在VDR 的表达。这也是其发挥免疫调节作用的基础。
国内学者张东涛等研究发现,HLA-DQA1 不同等位基因频率与类风湿性关节炎的易感性不同。倪莉等通过对CYP27B1 启动子(-1260,C / A)基因多态性与桥本甲状腺炎的研究发现,C 为易感基因位点,而A 可能是桥本抗原保护基因。李升等认为VDR 基因上的BsmⅠ和ApaⅠ位点多态性与广泛性侵袭性牙周炎无相关性,但需进行不同种族以及更大样本量的分析。
本研究通过PCR-RFLP 方法检测了VDR 基因启动子上存在的FokⅠ基因SNP 与CP / CPPS 发生之间的关系。发现A 组中ff 基因型例数高于B 组,差异有统计学意义, 说明ff 基因型与CP / CPPS 的发生有一定的关系,FokⅠ 多态性可能通过影响VDR 基因转录活性,从而影响其的免疫调节功能,进而导致CP / CPPS 的发生。但具体的分子生物学机制尚需行进一步研究。
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